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液相色譜等度系統(tǒng)的改善分離條件

點(diǎn)擊次數(shù):1255 發(fā)布時(shí)間:2022-05-09
  液相色譜等度系統(tǒng)的改善分離條件:
  在液相色譜等度系統(tǒng)定量分析中,分離開是首要要求?;€分離是提供結(jié)果的保障。
  含有5個(gè)組分或更少的樣品,使譜峰之間達(dá)到基線分離(R>1.5)一般較為容易。分離度會隨色譜柱的使用時(shí)間逐步降低,也會由于分離條件的微小波動(dòng)而在不同時(shí)間有所變化,因此在建立簡單混合物的分離方法時(shí),使R≥2。這樣的分離度將有利于改善測試晶度和方法的普適性;含10團(tuán)種或10種以上組分的樣品,分離一般會困難,目標(biāo)分離度往往必須降低至R>1.0—1.5。
  有些HPLC測定不必使部被測組分達(dá)到基線分離,這種情況zui常見于所測樣品中可能存在數(shù)種化合物但僅需檢測其中的一種時(shí)。比如在普查水或土壤樣品中的某污染物(如定性分析不同的除芳劑)時(shí),僅需要分離出個(gè)別除莠劑,確定其特征保留時(shí)間進(jìn)行峰鑒別即可。
  盡管大多數(shù)HPLC設(shè)備能在更的壓力下工作,使用色譜柱的工作壓力不應(yīng)過170bar(2500psi,17MPa),壓力上限在2000psi以下。
  限制該壓力基于兩點(diǎn)原因:*、隨著色譜柱的使用,微粒雜質(zhì)會逐步堵塞柱頭,使柱壓成倍升;第二、較低的壓力(<170bar)適于泵、進(jìn)樣閥、尤其是自動(dòng)進(jìn)樣裝置的穩(wěn)定工作,密封墊的壽命更長,色譜柱堵塞的情況減少,系統(tǒng)的耐久性明顯提。因此,以小于泵的zui大允許壓力的50%作為目標(biāo)壓力。

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